Edição Gênica por CRISPR/Cas9: Da Teoria à Prática

Etapa 4 - Confirmação do Plasmídeo Recombinante: Preparo de Amostras de DNA Plasmideal Para Sequenciamento e Análise dos Cromatogramas

Moraes-Almeida, Mariele Santos; Jesus-Ferreira, Henrique César; Leal-Lopes, Camila; Carreira, Ana Claudia Oliveira; Sogayar, Mari Cleide; Machado, Raquel Arminda Carvalho;

Resumo:

O sequenciamento é necessário para se confirmar a inserção da sequência-guia no vetor. O método mais acessível de sequenciamento, no momento, é o de Sanger, baseado na incorporação de didesoxinucleotídeos (ddNTPs) à cadeia nascente de DNA. Os ddNTPs não possuem o OH- na posição 3’, impedindo a ligação do próximo nucleotídeo, causando, assim, a parada de crescimento da cadeia.

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DOI: 10.5151/9786555501278-04

Referências bibliográficas
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Como citar:

MORAES-ALMEIDA, Mariele Santos; JESUS-FERREIRA, Henrique César; LEAL-LOPES, Camila; CARREIRA, Ana Claudia Oliveira; SOGAYAR, Mari Cleide; MACHADO, Raquel Arminda Carvalho; "Etapa 4 - Confirmação do Plasmídeo Recombinante: Preparo de Amostras de DNA Plasmideal Para Sequenciamento e Análise dos Cromatogramas", p. 47 -50. In: Edição Gênica por CRISPR/Cas9: Da Teoria à Prática. São Paulo: Blucher, 2022.
ISBN: 9786555501278, DOI 10.5151/9786555501278-04