Sistema de Edição Gênica CRISPR/Cas9

Moraes-Almeida, Mariele Santos; Jesus-Ferreira, Henrique César; Leal-Lopes, Camila; Carreira, Ana Claudia Oliveira; Sogayar, Mari Cleide; Machado, Raquel Arminda Carvalho;

Resumo:

A descrição do locus CRISPR (do inglês Clustered Regularly Interspaced Palindromic Repeats, originando o acrônimo CRISPR), ocorreu, pela primeira vez, em 1987, por Ishino e colaboradores, quando estudavam o gene iap, que atua na interconversão de isoenzimas da fosfatase alcalina, em E. coli. Naquela época, com dados insuficientes da sequência do DNA e com tecnologias não tão avançadas como as que possuímos nos dias atuais, não foi possível aos pesquisadores prever a função biológica daquelas sequências. Em 1993, o locus CRISPR foi também observado em Archaea (Haloferax mediterranei) e, em seguida, foi identificado no genoma de muitas outras bactérias. A conservação do mesmo locus em dois domínios da vida foi um indicativo de que, muito provavelmente, esta região possuía alguma importância. Porém, foi somente em 2005 que, de forma independente, Mojica e colaboradores, assim como Pourcel e colaboradores, reportaram que as sequências contidas nos espaçadores eram homólogas às sequências encontradas em bacteriófagos, pró-fagos e plasmídeos. Dessa maneira, demonstrou-se que organismos exógenos não eram capazes de infectar bactérias que possuíam, em seu locus CRISPR, sequências espaçadoras homólogas a trechos do DNA destes organismos. Tais publicações deram margem para hipóteses de que a sequência CRISPR poderia estar envolvida com a imunidade bacteriana.

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Referências bibliográficas
  • ​Alves EA, Guimarães ACR. Conceitos e Métodos - Cultivocelular. Repositório institucional da Fiocruz, 2010. Barrangou R, Marraffini LA. CRISPR-Cas Systems: prokaryotes upgrade to adaptiveimmunity. Volume 54. Molecular Cell, 2014. p: 234-244. Bloom MV, Freyer GA, Micklos DA. Laboratory DNA Science: an introduction torecombinant DNA techniques and methods of genome analysis. The Benjamin/CummingsPubl.Co.Inc, 1996.